Изучение роли полиморфизма генов, кодирующих цитокины, в развитии осложнений урогенитальной хламидийной инфекции у женщин

Полный текст

Заболеваемость урогенитальной хламидийной инфекцией (УГХИ) в Российской Федерации занимает первое место среди всех бактериальных инфекций, передаваемых половым путем, и составила в 2011 г. 65,9 на 100 000 населения [1]. УГХИ у женщин часто приводит к развитию осложнений со стороны урогенитального тракта, таких как воспалительные заболевания органов малого таза (ВЗОМТ) и трубное бесплодие, что может быть обусловлено особенностями генотипа человека. Известно, что полиморфизм в регуляторных областях генов, кодирующих прои противовоспалительные цитокины, может предопределять индивидуальную предрасположенность к развитию осложненного клинического течения аутоиммунных, иммуносупрессивных и воспалительных процессов в ответ на действие патологического агента. Наиболее часто в качестве генов, ассоциированных с развитием бесплодия у лиц, перенесших урогенитальный хламидиоз, в литературе указываются гены, кодирующие цитокины интерлейкин-10 (IL-10), туморнекроти-зирующий фактор (TNF), интерферон-Y (IFN-y) [2-4]. В то же время проблема прогнозирования осложненного клинического течения УГХИ, сопровождающегося осложнениями, в том числе бесплодием, на основании изучения полиморфизмов генов, кодирующих прои противовоспалительные цитокины, на данный момент изучена недостаточно. Целью исследования явилось изучение роли полиморфизма функционально значимых участков генов, кодирующих цитокины, в развитии осложнений УГХИ у женщин. Материал и методы В исследование включено 80 женщин, разделенных на 4 группы: 20 больных УГХИ нижних отделов мочеполового тракта (уретрит, цервицит); 20 больных осложненной УГХИ с поражением органов малого таза и других мочеполовых органов (сальпингит, сальпингоофорит, эндометрит); 20 больных вторичным бесплодием с неоднократными эпизодами УГХИ в анамнезе; 20 клинически здоровых женщин репродуктивного возраста. В отобранных генах изучали следующие однонуклеотидные замены: -308A/G (rs1800629) в TNF-А; -592AJC (rs1800872), -1082A/G (rs1800896) и -819T/C (rs1800871) в IL-10; 915G/C (rs1800471) и 869Т/С (rs1982073) в TGF-p; 204G/A (rs1800450) в MBL2, -174G/C (rs1800795) в IL-6; 874T/A (rs61923114) в IFN-y. Материалом для изучения полиморфизмов генов TNF-А, IL-10 TGF-e1, MBL2, IL-6 и IFN-y являлась геномная ДНК человека, выделенная из лейкоцитов периферической крови. Для анализа полиморфизмов генов использовали метод SNaPshot. Реакция SNaPshot основана на детекции методом секвенирования присоединенного к специфическому праймеру дидезоксинуклеотида, несущего флюоресцентную метку. В ходе реакции происходит присоединение дидезоксинуклеотида, комплементарного позиции SNP, к 3-концу праймера и последующая детекция продукта присоединения методом капиллярного электрофореза. Исследование включало следующие этапы: получение биологических образцов, подбор праймеров для амплификации выбранных для изучения полиморфизмов генов и постановки реакции SNaPshot; выделение ДНК из биообразцов; амплификация ДНК выбранных генов, включающих исследуемые однонуклеотидные полиморфизмы, для последующей постановки реакции SNaPshot; проведение мультиплексной реакции SNaPshot со специфическими праймерами; анализ меченых SNaPshot-праймеров капиллярным электрофорезом на секвенаторе. Кровь для исследования в количестве 4-5 мл брали в вакутейнеры, в которых содержалась этиленди-аминтетрауксусная кислота в качестве стабилизатора свертывания крови. Для изучения полиморфизмов отобранных генов были подобраны праймеры для амплификации и сек-венирования участков генов, несущих однонуклеотидные полиморфизмы. последовательности генов были найдены в базе данных NCBI http://www.ncbi. nlm.nih.gov. Затем внутри полученных последовательностей генов с помощью программы Vector NTI были подобраны праймеры для амплификации фрагментов генов, содержащих позиции изучаемых полиморфизмов. Температура отжига для всех праймеров составляла 64 °С. Выделение ДНК из образцов крови проводилось по стандартной процедуре с использованием коммерческого набора реагентов DiatomTM DNA Prep 100 (фирма «Изоген», Россия) с применением лизирующе-го реагента, содержащего гуанидинтиоционат. Амплификацию ДНК проводили на термоциклере DNAEngineDyad (BioRad, США) с использованием следующих компонентов (конечная концентрация в полимеразной цепной реакции пЦР): 1 * Taq буфер, 2,5 мМ ионы магния, 2,5 мМ смесь dNTPs, 1-2 Ед. Taq-полимеразы, праймеры по 20 пмоль каждый, 200 нг геномной ДНК человека. Рекомендованные условия амплификации отобранных для исследования генов: 1 цикл: 95 °С 5 мин.; 30 циклов: 95 °С 30 с.; 64 °С 20 с.; 72 °С 30 с.; 1 цикл: 72 °С 10 мин. полученный пЦР-продукт очищали методом Exol-SAP. Для каждого образца использовали 2 Ед. щелочной фосфатазы SAP, 2 Ед. экзонуклеазы Exol, деионизованную воду (до объема 10 мкл) и 4 мкл пЦР-продукта. Инкубацию проводили при 37 °c в течение 1 ч. Затем инактивировали фермент при 72 °c в течение 15 мин. Очищенные продукты пЦР использовали в реакции SNaPshot. 46 к № 4, 2013 Для постановки реакции SNaPshot готовили реакционную смесь, используя реактивы набора ABI PRISM® SNaPshot™ MultiplexKit: 5 мкл SNaPshotReadyReactionMix, 1 мкл SNaPshot-праймера (0,15 пмоль/мкл), 1 мкл очищенной матрицы (ДНК) (0,15 пмоль/мкл) и 3 мкл деионизованной воды. В состав реакционной смеси SNaPshotReadyReactionMix входят ДНК-полимераза AmpliTaq, флюоресцентно меченные дидезоксинуклеозидтрифосфаты и буфер. Для постановки контрольной реакции готовили смесь: 5 мкл SNaPshot Ready Reaction Mix, 1 мкл контрольного праймера, 2 мкл pGEM-3Zf (+) и 2 мкл деионизованной воды. Для постановки отрицательного контроля вместо pGEM-3Zf использовали 2 мкл деионизованной воды. проведение реакции SNaPshot осуществлялось с использованием рекомендуемой фирмой-произ-водителем программы амплификации, включающей 25 циклов: 96 °c 10 с., 50 °c 5 с., 60 °c 30 с. Для очистки реакционной смеси от несвязавшихся флюоресцентно меченных дидезоксинуклеозидтри-фосфатов добавляли фермент (0,5 Ед. щелочной фос-фатазы SAP) и проводили инкубацию при 37 °С в течение 1 ч. Затем инактивировали фермент при 72 °c в течение 15 мин. Статистическая обработка результатов исследования проводилась с использованием пакета программ: Statistica for Windows 6,1 (Statsoft Inc., США) и программного обеспечения MS Excel (Microsoft). Описательная статистика качественных признаков (определение частоты встречаемости полиморфизмов генов) представлена абсолютными и относительными частотами. Сравнение несвязанных групп по качественным признакам (попарное сравнение частот молекулярногенетических показателей в группах больных и здоровых лиц, а также между группами больных) осуществляли с использованием двустороннего критерия х2 для таблиц сопряженности 2 * 2. Различия считали статистически значимыми при p < 0,05. Силу ассоциаций оценивали в значениях показателя отношения шансов оdds ratio (OR). Результаты исследования Результаты изучения у пациенток частоты распространения полиморфизмов функционально значимых участков генов, отобранных для исследования, представлены в таблице. В результате изучения полиморфизма отобранных генов были получены данные о распределении частот генотипов в исследованной выборке пациенток. В каждой изученной позиции генов выявлено распределение трех вариантов генотипа (два гомозиготных и один гетерозиготный), за исключением гена TGF-p1 в позиции 915, для которого выявлялись два варианта генотипа (гомозиготный и гетерозиготный). В общей выборке пациенток для каждого исследованного полиморфизма были определены наиболее часто встречающиеся варианты генотипов (рис. 1). Среди изученных генотипов наиболее часто встречались: генотип С/С гена IL-10 (позиция -592) в 46,3% случаев; генотип G/A гена IL-10 (позиция 1082) в 50,0%; генотип С/С гена IL-10 (позиция 819) в 41,2%; генотип G/G гена TNF-А, (позиция 308) в 62,5%; генотип T/A гена IFN-y (позиция 874) в 82,4%; генотип G/C гена IL-6 (позиция 174) в 38,7%; генотип G/A гена MBL (позиция 204) в 80,0%; генотип G/G гена TGF-p1 (позиция 915) в 83,7%; генотип Т/Т гена TGF-p1 (позиция 869) в 53,7%. В результате проведенных исследований были получены данные о распределении частоты распространения полиморфизмов функционально значимых участков генов, отобранных для исследования. Ген цитокина IL-10 при исследовании полиморфизма IL-10*С-592А в обследованной выборке получено следующее распределение аллелей: С 62,5% (100); А 37,5% (60). Генотип IL-10*-592C/C встречался у 37,5% обследованных женщин. Частота регистрации данного генотипа в группах обследованных колебалась от 35,0 до 70,0%. Следует отметить, что генотип IL-10*-592C/C статистически достоверно чаще встречался среди обследованных пациенток с вторичным (трубным) бесплодием по сравнению с пациентками с УГХИ 70,0 и 37,5% соответственно (OR = 3,89; X2 = 5,64; p < 0,05) и здоровыми женщинами 70,0 и 40,0% соответственно (OR = 4,67; х2 = 5,87; p < 0,05). Это позволяет рассматривать генотип IL-10*-592C/C и аллель С в качестве возможного маркера повышенного риска развития бесплодия у женщин. Аллель С на сегодняшний день рассматривается исследователями как аллель риска, поскольку наличие этого аллеля приводит к увеличению уровня экспрессии IL-10 и, как следствие, к модификации иммунного ответа организма на инвазию патогена [5]. Генотип IL-10*-592A/A являлся наиболее редким аллельным вариантом в исследованной выборке -20,0% случаев; в группах пациенток он встречался с частотой от 0 до 30,0%. Генотип IL-10*-592A/A статистически достоверно реже встречался среди обследованных пациенток с вторичным (трубным) бесплодием по сравнению с пациентками с УГХИ -(0,0 и 25,0% соответственно (OR = 0,16; х2 = 3,56; p = 0,05)) и здоровыми женщинами (0 и 30% соответственно (OR = 0,12; х2 = 4,33; p < 0,05)). Это позволяет рассматривать генотип IL-10*-592A/A и аллель А в качестве возможного протектора в отношении развития бесплодия у женщин. Наличие аллеля А, так называемого протективного аллеля (генотипы СА Вестник дерматологии и венерологии Научные исследования л 47 Таблица Частота распространения полиморфных вариантов генов у женщин с уГХИ нижних отделов урогенитального тракта (1-я группа) и органов малого таза (2-я группа), женщин с вторичным (трубным) бесплодием (3-я группа) и клинически здоровых женщин репродуктивного возраста (4-я группа), абс. (%) Ген Позиция Генотип Группа 1 (n = 20) Группа 2 (n = 20) Всего пациенток с УГХИ (n = 40) Группа 3 (n = 20) Группа 4 (n = 20), Общая выборка (n = 80) IL-10 C(-592)A СС 7 (35,0) 8 (40,0) 15 (37,5) 14 (70,0) 8 (40,0) 37 (46,3) (rs1800872) АС 8 (40,0) 7 (35,0) 15 (37,5) 6 (30,0) 6 (30,0) 27 (33,7) АА 5 (25,0) 5 (25,0) 10 (25,0) 0 (0,0) 6 (30,0) 16 (20,0) G(-1082)A АА 6 (30,0) 6 (30,0) 12 (30,0) 5 (25,0) 6 (30,0) 23 (28,7) (rs1800896) GA 7 (35,0) 12 (60,0) 19 (47,5) 11 (55,0) 10 (50,0) 40 (50,0) GG 7 (35,0) 2 (10,0) 9 (22,5) 4 (20,0) 4 (20,0) 17 (21,3) C(-819)T CC 10 (50,0) 6 (30,0) 16 (40,0) 11 (55,0) 6 (30,0) 33 (41,2) (rs1800871) CT 6 (30,0) 7 (35,0) 13 (32,5) 6 (30,0) 10 (50,0) 29 (36,2) ТТ 4 (20,0) 7 (35,0) 11 (27,5) 3 (15,0) 4 (20,0) 18 (22,6) TNF-А G(-308)A GG 11 (60,0) 14 (70,0) 25 (62,5) 13 (65,0) 12 (60,0) 50 (62,5) (rs1800629) GA 8 (40,0) 6 (30,0) 14 (35,0) 3 (15,0) 7 (35,0) 24 (30,0) AA 1 (5,0) 0 (0,0) 1 (5,0) 4 (20,0) 1 (5,0) 6 (7,5) IFN-y T(874)A TT 1 (5,0) 0 (0,0) 1 (2,5) 6 (30,0) 0 (0,0) 7 (8,8) (rs61923114) ТА 17 (85,0) 18 (90,0) 35 (87,5) 11 (55,0) 20 (100,0) 66 (82,4) АА 2 (10,0) 2 (10,0) 4 (10,0) 3 (15,0) 0 (0,0) 7 (8,8) IL-6 G(-174)C СС 4 (20,0) 8 (40,0) 12 (30,0) 14 (70,0) 4 (20,0) 30 (37,5) (rs1800795) GC 11 (55,0) 6 (30,0) 17 (42,5) 4 (20,0) 10 (50,0) 31 (38,7) GG 5 (25,0) 6 (30,0) 11 (27,5) 2 (10,0) 6 (30,0) 19 (23,7) MBL G(-204)A GG 1 (5,0) 6 (30,0) 7 (17,5) 3 (15,0) 2 (10,0) 12 (15,0) (rs1800450) GA 19 (95,0) 14 (70,0) 33 (82,5) 15 (75,0) 16 (80,0) 64 (80,0) AA 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 2 (10,0) 2 (10,0) 4 (5,0) TGF-et G(-915)C CC 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) 0 (0,0) (rs1800471) GG 19 (95,0) 13 (65,0) 32 (80,0) 16 (80,0) 19 (95,0) 67 (83,7) GC 1 (5,0) 7 (35,0) 8 (20,0) 4 (20,0) 1 (5,0) 13 (16,3) Т(-869)С TT 15 (75,0) 7 (35,0) 22 (55,0) 12 (60,0) 9 (45,0) 43 (53,7) (rs1982073) TC 3 (15,0) 10 (50,0) 13 (32,5) 4 (20,0) 10 (50,0) 27 (33,7) CC 2 (10,0) 3 (15,0) 5 (12,5) 4 (20,0) 1 (5,0) 10 (12,5) и АА) исследователи связывают со сниженной продукцией IL-10 [5]. Генотип IL-10*-592A/C регистрировался в общей выборке обследованных с частотой 33,7%; в группах пациенток обнаруживался с частотой 30,0-40,0%. Достоверных различий в частоте данного генотипа между группами обследуемых установлено не было. При изучении полиморфизма IL-10*C-819T в исследованной выборке получено следующее распределение аллелей: С 59,4% (95); Т 40,6 % (65). Установлено, что генотип IL-10*-819C/C наиболее частый вариант в обследованной выборке женщин и встречался у 41,2% обследованных (30,0-55,0% в отдельных группах), но не среди женщин группы контроля, в этой группе наиболее распространен генотип IL-10*-819C/T (50,0% случаев). В общей выборке частота выявления генотипа составила 36,2%. Наименее частым вариантом полиморфизма IL-10*C-819T в исследованной выборке пациенток явился генотип IL-10*-819T/T (22,6%) (20,0-35,0% 48 к № 4, 2013 % 90 80 70 ““82“4_ _83,Z_ 60---50 -46Л40 _50Д_ --62,-5"4Г,2‘ 38г^-53тГ: СС АС АА IL-10 (-592) AA GA GG IL-10 (-1082) СС СТ ТТ IL-10 (-819) GG GA АА TNF-A (-308) ТТ GG IFN-y (874) IL-6 -174) GG GA АА MBL (-204) СС GG GС TGF-ві (-915) ТТ ТС СС TGF-ві (-869) Рис. 1. Распределение генотипов генов цитокинов в изученных позициях (п = 80). Красным цветом обозначены преобладающие в выборке генотипы 0 в группах пациенток). Достоверных различий в частоте встречаемости различных аллелей гена IL-10 в позиции -819 между группами пациенток не выявлено. Аллели при изучении полиморфизма IL-10*G -1082A распределились следующим образом: G 45,0% (72); А 55,0% (88). Генотип IL-10*-1082A/A регистрировался в общей выборке обследованных с частотой 28,7% и обнаруживался с близкой частотой во всех группах пациенток (25,0-30,0%). Достоверных различий в частоте регистрации генотипа между группами обследуемых установлено не было. Генотип IL-10*-1082G/A был наиболее частым вариантом полиморфизма IL-10*G-1082 в исследованной выборке пациенток (50,0%) и наблюдался у 35,0-60,0% женщин. Данный генотип достоверно чаще встречался у женщин с хламидийной инфекцией органов малого таза в сравнении с группой пациенток с хламидийной инфекцией нижних отделов урогенитального тракта (60 и 35% соответственно; OR = 2,79; X2 = 2,50; p = 0,01), что позволяет рассматривать его в качестве маркера повышенного риска развития осложнений УГХИ. Генотип IL-10*-1082G/G наиболее редкий среди обследованных женщин и встречался в 21,3% случаев (в разных группах пациенток частота колебалась от 10,0 до 35,0%). Данный генотип достоверно реже выявлялся у женщин с хламидийной инфекцией органов малого таза в сравнении с группой пациенток с хламидийной инфекцией нижних отделов урогенитального тракта (10 и 35% соответственно; OR = 0,21; X2 = 3,58; p = 0,05), что позволяет рассматривать его в качестве вероятного протектора развития осложнений УГХИ. Ген TNF-А По результатам изучения полиморфизма TNF-А* G-308A получено следующее распределение аллей в обследованной выборке: А 22,5% (36);G 77,5% (124). Генотип TNF-A*-308G/G встречался в общей выборке пациенток наиболее часто (62,5%; в отдельных группах от 60,0 до 70,0%). Генотип TNF-A*-308G/A встречался реже: в общей группе обследованных -30,0% (в отдельных группах пациенток 30,0-40,0%). Генотип TNF-A*-308A/A был наиболее редким аллельным вариантом полиморфизма в обследованной выборке (7,5%). Достоверных различий в частоте встречаемости различных аллелей гена TNF-А между группами пациенток выявлено не было. Ген IFN-y По результатам изучения полиморфизма IFN-у*Т-874А получено следующее распределение аллей в обследованной выборке: Т 50,0% (80); А 50,0% (80). Генотип IFN-y*874T/A наиболее частый вариант в исследованной выборке пациенток (82,4%). Частота регистрации генотипа в группах пациенток составила 55,0-100,0%. В сравнении с пациентками с бесплодием генотип IFN-y*874T/A достоверно чаще встречался у клинически здоровых женщин (OR = 0,06 ±; х2 = 8,53; p < 0,01) и женщин, больных УГХИ (OR = 0,17; х2 = 7,87; p < 0,01). Данный генотип можно рассматривать как Вестник дерматологии и венерологии Научные исследования л 49 вероятный протектор в отношении развития вторичного (трубного) бесплодия у женщин. Генотип IFN-y*874T/T редкий вариант полиморфизма IFN-y*T-874A в исследованной выборке (8,8%; в отдельных группах 0,0-30%). Наличие варианта Т/Т более характерно для пациенток с бесплодием, чем для здоровых (OR = 8,14; х2 = 4,33; р < 0,05) и пациенток с УГХИ (OR = 8,14; х2 = 4,33; р < 0,05). В этой связи генотип IFN-y*874T/T можно рассматривать как возможный маркер (предиктор) повышенного риска развития бесплодия у женщин. Других достоверных различий в частоте регистрации данного генотипа между группами обследуемых не установлено. Аллельная комбинация А/А полиморфизма IFN-Y*Т-874A в исследованной выборке пациенток встречалась достаточно редко (от 0,0 до 15,0% в отдельных группах пациенток). Ген IL-6 По результатам изучения полиморфизма IL-6* G-174C было получено следующее распределение аллей в обследованной выборке: G 45,0% (72); С -55,0% (88). Генотип IL-6 *174С/С регистрировался у 37,5% обследованных. Различия в частоте выявления данного генотипа между группами больных урогенитальной хламидийной инфекцией с поражением органов малого таза (40%) и нижних отделов урогенитального тракта (20%) оказались статистически достоверными (OR = 2,7; х2 = 1,9; р = 0,05). Кроме того, данный генотип достоверно чаще встречался в группе пациенток с вторичным (трубным) бесплодием по сравнению с больными урогенитальной хламидийной инфекцией нижних отделов урогенитального тракта) (OR=9,33; х2 = 10,1; р = 0,001) и здоровых (OR = 9,33; х2 = 10,1; р = 0,001). В связи с вышеизложенным данный генотип может рассматриваться как предиктор развития осложнений урогенитальной хламидийной инфекции и вторичного бесплодия у больных урогенитальной хламидийной инфекцией. Генотип IL-6*174G/C в изученной выборке был достаточно распространенным и регистрировался у 38,7% обследованных; в отдельных группах пациенток с частотой 20,0-55,0%. Среди пациенток группы контроля и пациенток с хламидийной инфекцией органов малого таза этот вариант оказался наиболее распространенным 50,0 и 55,0% случаев соответственно, в то время как для пациенток с вторичным бесплодием и хламидийной инфекцией органов малого таза наиболее характерен генотип IL-6*174C/C -70,0 и 40,0% соотвественно. Генотип IL-6*174G/G в обследованной выборке пациенток встречался наиболее редко (23,7%). Статистически значимых различий между группами пациенток для генотипов G/С и G/G не выявлено. Ген MBL Получено следующее распределение аллей в обследованной выборке: G 55,0% (88); А 45,0% (72). Генотип MBL2*204G/A был наиболее распространенным вариантом и встречался среди всех обследованных в 80,0% случаев. Достоверных различий в частоте регистрации данного генотипа между группами обследуемых не выявлено. Другие варианты генотипов были представлены реже. Частота регистрации генотипа MBL2*204G/G в группах обследованных составляла 5,0-30,0%, в общей выборке -15,0%. Разница между частотой регистрации генотипа MBL2*204G/G в группах пациенток с урогенитальной хламидийной инфекцией органов малого таза (30,0%) и нижних отделов урогенитального тракта (5,0%) оказалась статистически достоверной (OR = 8,14; х2 = 4,3; р < 0,05). В связи с вышеизложенным данный генотип может рассматриваться как возможный маркер риска развития осложнений у больных УГХИ. Однако окончательное заключение о роли данного генотипа в развитии осложнений УГХИ может быть сделано при увеличении объема выборки. Генотип MBL2*204A/A не был обнаружен в группах пациенток с хламидийной инфекцией, однако встречался в группе контроля и в группе больных вторичным бесплодием (по 10,0% случаев в группе). Ген TGF-P1 По результатам изучения полиморфизма TGF-p1*G -915С получено следующее распределение аллей в обследованной выборке: G 91,8% (147); С -8,1% (13). Генотип TGF-@*915C/C в исследованной выборке пациентов не встречался. Генотип TGF-p1*915G/G регистрировался наиболее часто (у 83,7% обследованных, в отдельных группах 65,0-95,0%). Достоверных различий в частоте регистрации данного генотипа между группами обследуемых не выявлено. Частота регистрации генотипа TGF-p*915G/C в разных группах пациенток различалась (от 5,0 до 35,0%), а в выборке в целом составила 16,3%. При проведении статистической обработки было установлено, что генотип TGF-@*915G/C наиболее характерен для пациенток с хламидийной инфекцией органов малого таза в сравнении с пациентками с хламидийной инфекцией нижних отделов урогенитального тракта (OR = 10,23; х2 = 5,63; p < 0,05), а также по сравнению с группой здоровых женщин. В связи с вышеизложенным данный генотип может рассматриваться как маркер повышенного риска развития воспалительных заболеваний органов малого таза при УГХИ. По результатам изучения полиморфизма TGF-p*T-869C получено следующее распределение аллей в обследованной выборке: T 70,6% (113); С 29,4% (47). 50 к № 4, 2013 установлено, что генотип TGF-@*869T/T среди обследованных регистрировался наиболее часто (53,7%). при этом частота его регистрации в группах пациентов различалась: данный генотип встречался у 75,0% лиц с хламидийной инфекцией нижних отделов урогенитального тракта и почти в 2 раза реже (35,0%) у пациенток с хламидийной инфекцией органов малого таза; различия между данными группами оказались статистически достоверными (OR = 0,18; X2 = 5,58; p < 0,05), что позволяет рассматривать данный генотип в качестве протектора развития осложнений уГХИ у женщин. Других достоверных различий между группами не выявлено. Генотип TGF-p*869T/C по частоте регистрации занял промежуточное положение (частота регистрации в выборке 33,8%). Он встречался у 15,0% лиц с хла-мидийной инфекцией нижних отделов урогенитального тракта и в 3 раза чаще (у 50,0%) у больных с хламидийной инфекцией органов малого таза; различия в частоте регистрации генотипа между данными группами статистически достоверны (OR = 5,67; х2 = 5,58; p < 0,05). Это позволяет рассматривать данный генотип в качестве предиктора развития осложнений уГХИ у женщин. Достоверных различий в частоте регистрации данного генотипа между другими группами обследуемых не установлено. Генотип TGF-@*869C/C в обследованной группе пациенток был наименее представленным (12,5%; в отдельных группах 5,015,0%). Достоверных раз личий в частоте регистрации данного генотипа между группами обследуемых не установлено. Заключение В результате проведенных исследований установлено наличие достоверных ассоциаций частоты регистрации полиморфных вариантов генов: IL-6, TGF-pv IL-10 и MBL2 с повышенным риском развития осложнений уГХИ, которые могут привести к нарушениям репродуктивной функции (рис. 2). частота регистрации генотипов IL-6*-174C/C, IL-10*-1082G/A, TGF-ei*-915G/C, TGF-p1*-869T/C и MBL2*-204G/G у пациенток с осложненным клиническим течением уГХИ (ВзОМТ) была достоверно выше (0,05 < p < 0,001), чем у пациенток с неосложненным течением заболевания (нижние отделы урогенитального тракта), что позволяет рассматривать данные генотипы как вероятные молекулярно-генетические маркеры повышенного риска развития осложнений уГХИ, приводящих к нарушениям репродуктивной функции пациенток. В ходе выполнения исследования также был установлен ряд генотипов генов IL-10, TGF-@1 (IL-10*-1082G/G, TGF-e1*-869T/T), которые могут играть протективную роль в развитии осложнений (ВзОМТ) у пациенток с уГХИ; данные генотипы достоверно реже (0,01 < p < 0,001) регистрировались у больных с уГХИ органов малого таза в сравнении с больными с неосложненным течением уГХИ. % 70 60 50 40 30 20 10 IL6-174C/C OR=2,8 1 OR=5,7 OR=2,7 J IL10-1082G/A TGF{$1 -915G/C TGF-P1 -869T/C MtSLZ -204G/G Генотип Пациентки с хламидийной инфекцией органов малого таза Пациентки с хламидийной инфекцией нижних отделов урогенитального тракта Рис. 2. Распределение частот генотипов генов IL-6, IL-10, TGF-в, и MBL2у женщин с хламидийной инфекцией органов малого таза и нижних отделов урогенитального тракта 0 Вестник дерматологии и венерологии Научные исследования л 51 Полученные данные позволяют использовать определение полиморфизма генов с целью прогнозирования осложненного течения УГХИ и предотвращать развитие осложнений при своевременном определении риска. В процессе исследования был также обнаружен ряд генотипов, которые могут являться потенциальными молекулярно-генетическими маркерами повышенного риска развития вторичного (трубного) бесплодия у женщин (IL-6*-174C/C, IL-10*-592C/C, IFN-y *874Т/Т), а также маркерами-протекторами в отношении развития вторичного бесплодия (IL-10*-592A/A, IFN-y*874T/A). Содержание этих генотипов достоверно различалось в группах пациенток с бесплодием и здоровых лиц (p < 0,001). Результаты проведенных исследований вносят вклад в изучение молекулярно-генетических основ развития осложнений УГХИ, приводящих к нарушению репродуктивной функции пациентов, и могут быть использованы при разработке персонализированного подхода к выбору тактики ведения и лечения пациентов с УГХИ. I Литература

Об авторах

К И Плахова

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: plahova_xenia@mail.ru
к.м.н., старший научный сотрудник отдела инфекций, передаваемых половым путем 107076, москва, ул. Короленко, д. 3, стр. 6

Список литературы

Дополнительные файлы