Application of biomedical cell products in the treatment of congenital epidermolysis bullosa

Full Text

Введение

Врожденный буллезный эпидермолиз – группа наследственных заболеваний кожи, обусловленных мутациями в генах структурных белков эпидермиса и дермо-эпидермального соединения, участвующих в адгезии эпидермиса к подлежащей дерме [1]. В результате мутаций уменьшается продукция структурных белков кожи вплоть до полного отсутствия либо нарушение их структуры, что приводит к уменьшению адгезивных свойств. В результате ослабляется связь между эпидермисом и дермой и уменьшается устойчивость кожи и слизистых оболочек к механическим воздействиям. Вследствие этого незначительные механические травмы приводят к появлению основных клинических признаков врожденного буллезного эпидермолиза – пузырей и/или эрозий на коже и слизистых оболочках. При постоянном механическом травмировании кожи эрозии долго не заживают, трансформируясь в хронические язвы. Неэффективность репаративных процессов и постоянная активация процессов регенерации в краях длительно существующих язв, характерная для дистрофического эпидермолиза, способствует формированию очагов быстро метастазирующего плоскоклеточного рака, который приводит к ранней смерти больных рецессивным дистрофическим врожденным буллезным эпидермолизом (в среднем в возрасте 30–40 лет) [2-4].

В настоящее время доступна только симптоматическая терапия эрозивных и язвенных дефектов, включающая в себя профилактику вторичной инфекции, обезболивание, использование атравматичных неадгезивных перевязочных средств и коррекцию осложнений [5, 6]. В качестве потенциально эффективного средства, способного обеспечить быстрое заживление эрозивно-язвенных дефектов у больных врожденным буллезным эпидермолизом, разрабатываются эквиваленты кожи (ЭК) - трёхмерные тканеинженерные конструкции на основе культивируемых in vitro клеток кожи и различных синтетических или органических носителей [7-9]. В качестве каркаса для структурной и/или функциональной поддержки клеток используют различные материалы, наиболее распространенными из которых являются коллаген I типа и гиалуроновая кислота [10]. Эти биоматерилы обладают низкой токсичностью и иммуногенностью, хорошей биоразлагаемостью, а также имеют естественные эпитопы, которые позволяют им поддерживать функциональность межклеточного матрикса на физиологическом уровне [10].

ЭК классифицируются в зависимости от клеточного состава: содержащие кератиноциты (эпидермальные ЭК), фибробласты (дермальные ЭК) либо их сочетание (комбинированные ЭК) [10]. 

 

 

Рисунок 1.    Схематический обзор ЭК, которые используются у пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом. Для создания ЭК клетки кожи человека (фибробласты и/или кератиноциты) выделяют из биоптата кожи, культивируют и используют в сочетании с матриксом или без него. ЭК можно классифицировать в зависимости от их клеточного состава: содержащие кератиноциты с подлежащей бесклеточной дермальной матрицей либо без неё  (эпидермальные ЭК), фибробласты, встроенные в дермальную матрицу (дермальные ЭК) либо сочетание кератиноцитов и дермальной матрицы с фибробластами (комбинированные ЭК) Переведено на русский язык и адаптировано из источника [10]. Статья находится под лицензией Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

Figure 1. Schematic overview of the tissue-engineered skin substitutes assessed for epidermolysis bullosa. To generate tissue-engineered skin substitutes, human skin cells (fibroblasts and/or keratinocytes) are isolated from skin biopsies, expanded under different cell culture conditions, and used in conjunction with or without some form of scaffolding material. Tissue-engineered skin substitutes can be categorised based on their cellular composition: epidermal substitutes consist of an epidermal layer of stratified keratinocyte sheets with or without an underlying acellular dermal layer containing scaffolding; dermal substitutes contain fibroblasts embedded within a scaffolded dermal matrix; composite substitutes are composed of an epidermal layer of stratified keratinocyte sheets and an underlying scaffolded dermal layer containing fibroblasts. This figure was translated into Russian and adapted from the source [10]. The article is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

 

В зависимости от происхождения этих клеток ЭК подразделяются на аутотрансплантаты (ЭК, созданные с использованием аутологичных клеток) и аллотрансплантаты (ЭК, созданные с использованием аллогенных клеток) [10]. И ауто-, и аллотрансплантанты имеют как преимущества, так и недостатки.

С одной стороны, применение аллогенных клетки исключает необходимость оперативного вмешательства для получения биоматериала, которое может быть обременительным для пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом, и длительного ожидания культивирования клеток после получения биоматериала [10]. Кроме того, аутологичные клетки могут иметь изначальную мутацию, что приведет к повторному образованию пузырей при травматизации трансплантированного участка [11]. Этот недостаток аутологичных клеток можно нивелировать взятием биоматериала из клинически интактных участков кожи, содержащих ревертантные клетки, либо генетической модификацией с использованием ретровирусных векторов [10, 12-14, 15-17].

С другой стороны, аллогенные клетки имеют более высокий риск отторжения и инфицирования трансплантата из-за возможной реакции иммунной системы пациента, [10, 11]. Тем не менее есть данные об успешном применении не только ЭК на основе аллогенных клеток, полученных от близкого родственника, но и коммерчески доступных эквивалентов кожи Kaloderm^®, Dermagraft^® и Apligraf^® [18-22].

Таким образом, аллотрансплантаты могут быть использованы как временное покрытие раны на период ожидания пациентом изготовления аутологичной  тканеинженерной конструкции либо при невозможности получения аутобиоматериала в связи с обширным поражением кожного покрова [10].

 

Эпидермальные трансплантаты

Среди всех биомедицинских клеточных продуктов в терапии эрозивно-язвенных дефектов у пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом наиболее изучено применение эпидермальных тканеинженерных консрукций. Это связано с тем, что именно кератиноциты экспрессируют большую часть белков дермо-эпидермального соединения, участвующих в патогенезе всех подтипов ВБЭ. Большинство эпидермальных тканеинженерных конструкций разработано на основе метода, предложенного Rheinwald J.G. и Green H., который заключается в выделении кератиноцитов из кожных биоптатов площадью 1-4 см² и дальнейшем их культивировании до образования пластов общей площадью примерно 6000-40000 см² [10, 23-25].   Заживление ран при наложении эпидермальных тканеинженерных конструкций обусловлено пролиферацией и миграцией кератиноцитов, а также экспрессией ими факторов роста, стимулирующих ангиогенез (VEGF), хемокинов (CCL5) и провоспалительных цитокинов (IL-1a, TNF-a). Однако в связи с отсутствием дермального компонента эпидермальные тканеинженерные конструкции не обладают способностью к ремоделированию тканей и образованию грануляций, что делает их более применимыми либо в случае наличия гранулирующих ран, либо в качестве второго этапа после предварительного наложения дермального трансплантата [26].

Механическая хрупкость пластов из культивированных кератиноцитов, а также их уязвимость в отношении бактериальных и микотических инфекций существенно усложняет их первоначальное наложение и дальнейшую иммобилизацию на раневой поверхности  [25, 27-29]. Так,  Wollina U. и коллеги описали клинический случай успешного лечения пациентки с рецессивным дистрофическим тяжелым генерализованным подтипом буллезного эпидермолиза (Аллопо-Сименса) с использованием эпидермальных аутологичных кератиноцитов, размещенных на перфорированной мембране из низкомолекулярной гиалуроновой кислоты [29]. ЭК был трансплантирован на три длительно существующих эрозивных дефекта и зафиксирован на раневой поверхности с помощью сетчатого полимерного покрытия; с целью профилактики вторичной инфекции одновременно с трансплантацией пациентке проводилась системная антибактериальная терапия [29]. В течение одного года наблюдалась полное заживление двух эрозий на коже спины, однако эрозия на коже головы эпителизировалась не полностью. Авторы публикации связывают это с механическим отрывом части ЭК в результате трудностей, возникших при фиксации ЭК c помощью перевязочных материалов из-за анатомической сложности данной зоны [29].

Для увеличения периода нахождения  кератиноцитовых трансплантатов на поверхности эрозии используют защитные шлемы-маски, надеваемые на период сна в случае локализации трансплантатов на лице, рассасывающиеся швы для фиксации тканеинженерных конструкций и бесклеточные дермальные матриксы (фибрин, губки из коллагена 1 типа, мембраны на основе низкомолекулярной гиалуроновой кислоты, силиконовые мембраны, вазелиновые марлевые повязки) [25, 30-33].  Биологические основы, фибрин и гиалуроновая кислота, считаются благоприятным микроокружением для регенерации раны за счет стимуляции миграции, пролиферации и дифференцировки кератиноцитов [33].

Carter D.M. и коллеги описали собственный опыт применения эпидермальных ЭК (аутологичных кератиноцитов, нанесенных на губки из коллагена I типа) у 3 пациентов с пограничным буллезным эпидермолизом [31].  У всех трёх пациентов были длительно существовавшие эрозии на коже лица. У двух пациентов после 8 и 7 последовательных наложений тканеинженерных конструкций в течение 1 года и 7 месяцев, соответственно, отмечалась полная эпителизация раневой поверхности с частичной репигментацией. У третьего пациента была достигнута лишь частичная эпителизация после шести процедур, выполненных в течение 9 месяцев, однако на момент публикации курс терапии не был завершен [31].

Стоит отметить, что через 1 месяц после полного заживления эрозий у одного из пациентов появились пузыри над участками трансплантации после получения травмы, что свидетельствует о сохранении изначальных мутаций на данных участках кожи, что является основным недостатком применения аутологичных ЭК у пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом [31]. Чтобы нивелировать этот недостаток, была разработана методика создания аутологичных тканеинженерных конструкций с использованием клеток, выделенных из интактных (не склонных к появлению пузырей и эрозий) участков кожи, которые, как известно, содержат генетически ревертантные клетки, скомпенсировавшие изначальную мутацию новыми мутациями [10]. Это явление известно как ревертантный мозаицизм и описано для всех подтипов врожденного буллезного эпидермолиза (гены KRT14, LAMB3, COL17A1, FERMT1, COL7A1) [10]. У пациентов с пограничным буллезным эпидермолизом сообщается о чрезвычайно высокой частоте мутаций COL17A1 и LAMB3 - 36% и 33% соответственно [34].

В 2009 году Gostynski A. и коллеги впервые опубликовали результаты терапии больного пограничным буллезным эпидермолизом с использованием ЭК на основе клеток ревертантной кожи [12]. Спустя четыре месяца после трансплантации аутологичного эпидермального лоскута, полученного из кератиноцитов ревертантной кожи, «акцепторный» эрозивный дефект (изначально составлявший 84 см²) полностью эпителизировался без образования рубцы, однако проверка устойчивости зажившей кожи к механическому воздействию показала сохранение дисфункции адгезивных свойств (при трении трансплантированного участка кожи произошла отслойка эпидермиса) [12]. Ретроспективный анализ показал, что только 3% кератиноцитов из «акцепторной» области содержали ревертантный коллаген XVII типа, несмотря на то, что «донорский» участок кожи содержал ~30% ревертантных клеток, что может являться причиной  функционального дефекта реэпителизированного участка кожи [10, 12]. Теоретически подобный феномен можно объяснить вытеснением ревертантных клеток кератиноцитами, которые мигрировали из краев акцепторного участка или резервуаров стволовых клеток в придатках кожи в процессе эпителизации [10].

Shinkuma S. и коллегами была предпринята попытка трансплантации эпидермального ЭК на основе аутологичных кератиноцитов, взятых из клинически интактного участка кожи спины, на поверхность четырёх эрозий 12-летнему мальчику с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом [13]. В одной из четырёх эрозий отмечалась практически полная эпителизация по истечению двух недель, однако в трёх других эрозивных дефектах заживления не было в связи с механическим смещением трансплантированных эпидермальных лоскутов сразу после пересадки [13].

В 2019 году Matsumura W. с коллегами опубликовали результаты одноцентрового исследования, в котором оценивалась эффективность применения лоскутов на основе кератиноцитов, взятие биоматериала для которых было выполнено из клинически неизменных участков у пациентов с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом [14]. На восемь эрозивных дефектов у трёх пациентов с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом были наложены листы из культивированных аутологичных кератиноцитов [14]. У двух пациентов отмечалась полная эпителизация подвергнувшихся данной процедуре эрозий через 76 недель от момента наложения лоскутов, однако у одного пациента в связи с неоднократным повторным образованием пузырей на местах трансплантации достичь полной эпителизации не удалось [14].

Сложность создания подобных ЭК заключается в трудности клинической идентификации участков кожи с достаточной популяцией генетически ревертантных клеток. В качестве альтернативы было предложено использование аутологичных кератиноцитов, генетически скорректированных методом трансдукции ретровирусными векторами, несущими полноразмерные копии генов дикого типа, кодирующих белки зоны базальной мембраны. После интеграции в геномную ДНК трансгены обеспечивают стабильную экспрессию белков и компенсируют отсутствие функции мутантного гена [10, 15-17].

Первая демонстрация клинического эффекта генно-модифицированных ЭК была описана Mavilio F. и его коллегами в 2006 году [17]. На основе аутологичных кератиноцитов, полученных у пациента с пограничным буллезным эпидермолизом и трансдуцированных ретровирусными векторами, экспрессирующими полноразмерную кДНК LAMB3 под контролем вируса Молони, были выращены эпидермальные ЭК [17]. Полученные ЭК в октябре 2005 года были нанесены на длительно существующие эрозивно-язвенные дефекты и участки предварительно хирургически удаленного LAM5-b3-дефицитного эпидермиса в области нижних конечностей [17, 35]. Полная регенерация эпидермиса была отмечена на 8-е сутки после нанесения ЭК, а стабильность эпидермиса сохранялась на протяжении 16 лет, о чем было сообщено в более поздней публикации от 2021 года [17, 35].

Чтобы оценить пригодность генетически модифицированных эпидермальных ЭК в терапии пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом с большой площадью поражения кожного покрова, осенью 2015 данная методика лечения была применена у мальчика с дефицитом LAMB3 и тяжелым пограничным буллезным эпидермолизои [15]. В течение 2015-2016 года было проведено последовательное наложение ЭК на эрозивные поверхности, занимавшие более 60% кожного покрова, которое привело к регенерации дефектов с восстановлением адгезивных функций кожи [15]. Примечательно, что трансплантированные участки оставались устойчивыми к механическому воздействию спустя пять после проведения медицинского вмешательства [36].

В 2017 году Bauer J.W. и коллегами был описан случай успешной терапии рефрактерной к проводившемуся ранее лечению, существующей более 10 лет язвы площадью примерно 80 см² на голени пациентки с генерализованным промежуточным ламинин-332-β3-зависимым пограничным буллезным эпидермолизом с использованием аналогичного метода [16]. Полное приживление трансплантата наблюдалось на 14-е сутки, а эффект в виде устойчивости трансплантированного участка к механическому воздействию сохранялся в течение 16-месячного периода наблюдения [16]. Спустя год после наложения лоскута была выполнена биопсия кожи из области трансплантированного участка [16]. Гистологическое исследование биоптата кожи показало наличие дифференцированного эпидермиса и дермо-эпидермального соединения, согласно результатам иммунофлуоресцентного анализа, количество ламинина 332 в биоптате кожи было сопоставимо с уровнем в контрольном биоптате, по данным просвечивающей электронной микроскопии морфология зоны базальной мембраны нормализовалась после трансплантации, а гибридизация in situ с использованием вектор-специфичных зондов LAMB3 показала гомогенную экспрессию LAMB3 мРНК во всех слоях  эпидермиса [16]. Поскольку эпидермис человека обновляется ежемесячно, трасплантированный эпидермис претерпел не менее 16 полных циклов обновления в течение 16 месяцев наблюдения, таким образом, длительное поддержание регенерированного эпидермиса осуществляется за счет самообновляющихся трансдуцированных эпидермальных стволовых клеток и не имеет тенденции к замещению акцепторными клетками, имеющими мутацию [16].

ЭК на основе аллогенных кератиноцитов, полученных от здоровых доноров, также используют в терапии пациентов с врожденным буллезным эпидермолизом, однако их применение ограничено трудностями приживления в долгосрочной перспективе [10]. В связи с этим эпидермальные аллотрансплантаты исследовались либо в качестве временных повязок в сочетании с аутотрансплантатами, либо в тех случаях, когда использование аутологичных клеток было нецелесообразным. McGrath с коллегами предприняли безуспешную попытку применения аллогенных эпидермальных ЭК в лечении 10 пациентов в возрасте от 18 до 44 лет с тяжелым генерализованным рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом [11]. Трансплантация выполнялась во время пластической операции, направленной на восстановление функций кистей рук, измененных по типу псевдосиндактилии и «рукавицы». Несмотря на некоторое уменьшение болевых ощущений, значительного клинического эффекта в местах трансплантации не отмечалось, однако стоит отметить, что период наблюдения в данном исследовании был чрезвычайно коротким [11].

 Биологическое родство донора и реципиента может увеличивать шансы на благоприятный исход трансплантации. Так, был описан опыт применения эпидермальных аллогенных ЭК, созданных на основе кератиноцитов, взятых у матери пациента, для лечения эрозивно-язвенных очагов на лице у пятилетнего пациента с пограничным буллезным эпидермолизом [37]. После проведения четырех последовательных процедур наложения ЭК в течение шести месяцев, дефекты реэпителизировались и оставались закрытыми в течение восьмимесячного периода наблюдения [37].

Существует также коммерчески доступный культивированный ЭК Kaloderm^®, созданный на основе кератиноцитов, полученных из кожи новорожденного. Описан опыт его применения у новорожденного ребенка с простым буллезным эпидермолизом [19]. Трехкратное наложение данного ЭК на эрозии привело к практически полной эпителизации 14 суток спустя, однако долгосрочного наблюдения не проводилось, так же, как и оценки устойчивости трансплантированного участка к механическим воздействиям [19].

Дермальные трансплантаты

Впервые метод культивирования дермальных аллотрансплантатов был предложен Kubo K. и Kuroyanagi Y. [10, 38].

В 2010 году Natsuga K. и коллеги описали собственный опыт трансплантации аллогенного дермального ЭК на длительно существующие дефекты кожи у двух пациентов с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом дважды в неделю в течение первых двух недель и далее один раз в неделю [39]. У одной пациентки эрозия, существовавшая до этого в течение десяти месяцев, полностью эпителизировалась за четыре недели терапии; у другой – эрозия, появившаяся за шесть месяцев до начала терапии, полностью эпителизировалась в течение трех недель [39]. Однако методом иммунофлюоресценции было доказано, что выработка коллагена 7 типа в местах трансплантации не превосходит его выработку других участках кожи пациентов [39]. Это позволило авторам предположить, что эпителизация обусловлена продукцией цитокинов и факторов роста фибробластами (VEGF, bFGF, HGF, KGF, PDGF, TGF-beta1, IL-6, Il-8) [39].

Hasegawa T. с коллегами использовали аллогенные дермальные ЭК, состоящие из фибробластов, расположенных на губке из коллагена и гиалуроновой кислоты, в лечении хронических эрозий, существовавших более 10 месяцев, у трех пациентов с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом [40]. Трансплантация ЭК проводилась два раза в неделю в течение двух-шести недели, появление грануляционной ткани наблюдалось через одну неделю, а начало эпителизации от периферии к центру через четыре недели от начала терапии, однако данные о долгосрочном наблюдении пациентов представлены не были [40].

В исследовании, проведённом Moravvej H.A. и коллегами, сравнивалась эффективность инъекций фибробластов и дермального ЭК, созданного на основе фибробластов и амниотической мембраны [41]. У семи пациентов с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом было выбрано по семь длительно существующих эрозий, в области трёх из которых выполнялись инъекции фибробластов, три покрывались аллогенным дермальным ТиК и одна использовалась в качестве контрольной – обрабатывалась с использованием стандартных перевязочных материалов [41]. За 12-недельный период наблюдения 21 эрозии, покрытой дермальным ЭК, только одна эпителизировалась полностью и всего шесть эпителизировались более чем на 70%, что превосходит по эффективности обычные перевязочные материалы, однако значительно уступает инъекциям фибробластов в область раны [41].

Имеется коммерчески доступный дермальный ЭК – Dermagraft^®. В 2005 году было проведено исследование для оценки его эффективности в терапии длительно существующих эрозий у шести пациентов с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом [18]. На четвёртой неделе после трансплантации отмечалась ~95% эпителизации всех участков, однако уже к восьмой неделе наблюдения повторные травмы привели к уменьшению площади эпителизированной поверхности [18].

Комбинированные трансплантаты

В 1998 году Eisenberg M. и Llewelyn D. описали успешный опыт применения культивированных композитных аллотрансплантатов у 7 детей с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом, в качестве вспомогательного этапа во время пластических оперативных вмешательств, направленных на коррекцию синдактилий и сгибательных контрактур [42]. Аллотрансплантаты создавались путем помещения фибробластов и кератиноцитов на разные стороны пористых коллагеновых губок [42].

Betsi E. с коллегами в 2009 году также описали собственный опыт использования комбинированного эквивалента кожи у пациента с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом (Аллопо-Сименса) после операции по восстановлению функциональной способности пальцев кистей [43]. Транплантация проводилась поэтапно. Первоначально на послеоперационную рану была нанесена подготовительная основа (Matriderms, бычий коллаген I, III, V и бесклеточный дермальный матрикс на основе гидролизата эластина), через десять дней после этого на раневые дефекты была помещена конструкция из совместно культивированных фибробластов и кератиноцитов [43]. Полная эпителизация завершилась через 2 года после трансплантации, и пациент смог полноценно использовать обе кисти в повседневной жизни [43].

Коммерчески доступный комбинированный аллотрансплантат Apligraf^® представляет собой тканеинженерную конструкцию, включающую дермальный слой неонатальных фибробластов, гель на основе коллагена I типа и эпидермальный слой неонатальных кератиноцитов [10]. Считается, что данный ЭК стимулирует заживление ран за счет экспрессии цитокинов, факторов роста и белков внеклеточного матрикса [10].

Об использовании Apligraf^® в терапии простого буллезного эпидермолиза впервые сообщили Falabella A.F. с коллегами в 1999 году [20]. Новорожденной девочке было проведено наложение ЭК на обширные эрозии на коже левой нижней конечности и правой верхней конечности в области локтя, с положительным эффектом в виде полной эпителизации эрозивных дефектов [20]. Через 11 недель после трансплантации на большей части поверхности наложенных ЭК не наблюдалось новых пузырных и эрозивных элементов [20].

Эти многообещающие результаты послужили стимулом для начала исследования безопасности и эффективности Apligraf^® в группе из пятнадцати пациентов с различными подтипами буллезного эпидермолиза (девять пациентов с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом, пять – с простым буллезным эпидермолизом, один с пограничным буллезным эпидермолизом), которым был нанесен ЭК на 78 раневых дефектов (из которых девять были длительно существующими и трудно поддающимися терапии, а шестьдесят девять появились недавно). Через 18 недель отмечалась эпителизация 79% недавно появившихся эрозий. Четыре из девяти хронических эрозий эпителизировались спустя 12 недель, однако через 18 недель только в двух из них сохранился достигнутый эффект [21].

В другом исследовании описано применение Apligraf^® у девяти детей с различными подтипами буллезного эпидермолиза (пять с рецессивным дистрофическим буллезным эпидермолизом, три с простым буллезным эпидермолизом, один с пограничным буллезным эпидермолизом) [22]. Авторами была описана эпителизация более чем 90% эрозий в течение периода наблюдения у 8 детей из 9 [22]. Один из детей с пограничным буллезным эпидермолизом (подтип Херлитца) скончался от дыхательной недостаточности на 28 дне жизни, что сделало невозможной оценку эффективности Apligraf ^® в долгосрочной перспективе у данного пациента, однако стоит отметить что за 17 дней наблюдения отмечалось появление грануляционной ткани и частичная эпителизация эрозивных дефектов [22].

Несмотря на успешный опыт применения Apligraf^®, относительно высокая стоимость и короткий срок годности (от пяти до десяти дней) создают препятствия для рутинного клинического использования [10].

 

Заключение

Таким образом, все опубликованные к настоящему времени исследования эффективности биомедицинских клеточных продуктов в терапии врожденного буллезного эпидермолиза проводились на малых и разнородных выборках пациентов, что обусловлено орфанностью заболевания (таблица 1). В большинстве исследований пациенты находились под наблюдением в течение короткого периода времени, что не позволяет делать выводы о долгосрочных эффектах, положительных и отрицательных, трансплантации ЭК. Однако, несмотря на ограниченный опыт, имеющиеся публикации демонстрируют высокую эффективность ЭК и позволяют рассматривать их в качестве перспективного метода терапии  эрозивно-язвенных дефектов у пациентов с различными подтипами буллезного эпидермолиза. Отсутствие зарегистрированного на территории Российской Федерации ЭК определяет необходимость проведения дальнейших исследований, направленных на создание отечественного медицинского изделия, превосходящего зарубежные аналоги.

 

Таблица 1. Результаты терапии эрозивно-язвенных дефектов кожи с использованием эквивалентов кожи у больных врожденным буллезным эпидермолизом

Table 1. Wound healing results using tissue-engineered skin substitutes in patients with epidermolysis bullosa 

 

Эквиваленты кожи	Количество пациентов (дефектов кожи)	Вид  клеточной терапии	Период наблюдения	Эффективность	Иссле-дование
Эпидермальные	1 (3)	Культивированные аутологичные кератиноциты на мебране из гиалуроновой кислоты	1 год	2 дефекта кожи – полная эпителизация 1 дефект кожи – эпителизация более чем на 50%	Wollina U, et al. 2001 [29]
	3 (-)	Культивированные аутологичные кератиноциты на коллагеновой губке	1 год, 7 месяцев, 9 месяцев – у каждого из трех пациентов соответственно	1 пациент – полная эпителизация и частичная репигментация дефектов кожи 1 пациент – полная эпителизация дефектов кожи 1 пациент – частичная эпителизация дефектов кожи	Carter DM, et al. 1987 [31]
	1 (1)	Культивированные аутологичные кератиноциты (полученные из ревертантного участка кожи)	4 месяца	Полная эпителизация без восстановления функциональности дермо-эпидермального соединения в трансплантированном участке кожи	Gostynski A, et al. 2009 [12]
	1 (4)	Культивированные аутологичные кератиноциты (полученные из ревертантного участка кожи)	16 лет	1 дефект кожи – частичная эпителизация спустя 2 недели и частичное восстановление функциональности дермо-эпидермального соединения 3 дефекта кожи – нет эффекта	Shinkuma S, et al. 2014 [13]   Matsumura W, et al. 2019 [14]
	3 (8 суммарно у всех пациентов)	Культивированные аутологичные кератиноциты (полученные из ревертантного участка кожи)	76 недель	2 пациента – полная эпителизация 1 пациент – частичная эпителизация и повторное возникновение язвенных дефектов на трансплантированных участках кожи	Matsumura W, et al. 2019 [14]
	1 (-)	Культивированные аутологичные кератиноциты (генетически скорректированные)	16 лет	Все дефекты кожи – полная эпителизация и восстановление функциональности дермо-эпидермального соединения	Mavilio F, et al. 2006 [17] De Rosa L, et al.   2021 [35]
	1 (~80% площади кожного покрова)	Культивированные аутологичные кератиноциты (генетически скорректированные)	5 лет и 5 месяцев	Все дефекты кожи – полная эпителизация и восстановление функциональности дермо-эпидермального соединения	Hirsch T, et al. 2017 [15] Kueckelhaus M, et al.   2021 [36]
	1 (1)	Культивированные аутологичные кератиноциты (генетически скорректированные)	16 месяцев	Дефект кожи – полная эпителизация и восстановление функциональности дермо-эпидермального соединения	Bauer JW, et al. 2017 [16]
	10 (10 суммарно у всех пациентов)	Культивированные аллогенные кератиноциты	4 недели	Не наблюдалось преимущества в эпителизации трансплантированных участков в сравнении с контрольными дефектами кожи, однако отмечался анальгетический эффект эквивалентов кожи у 9 пациентов из 10	Hill JC, et al. 1992 [11]
	1 (>1)	Культивированные аллогенные кератиноциты	8 месяцев	Все дефекты кожи – частичная эпителизация	Hill JC, et al. 1992 [37]
	1 (>1)	Kaloderm®	3 недели	Все дефекты кожи – частичная эпителизация	Shin KC, et al. 2011 [19]
Дермальные	2 (2 суммарно у всех пациентов)	Культивированные аллогенные фибробласты	3 недели и 4 недели – у двух пациенток соответственно	Все дефекты кожи – полная эпителизация	Natsuga K, et al. 2010 [39]
	3 (-)	Культивированные аллогенные фибробласты на губке из коллагена и гиалуроновой кислоты	2-6 недель	Все дефекты кожи – частичная эпителизация	Hasegawa T, et al. 2004 [40]
	7 (21 суммарно у всех пациентов)	Культивированные аллогенные фибробласты на амниотической мембране	12 недель	1 дефект кожи – полная эпителизация 6 дефектов кожи – эпителизация более чем на 70% 70% от общего количества дефектов кожи – эпителизация менее чем на 50%	Sibbald RG, et al. 2005 [41]
	6 (от 6 до 19 у каждого из пациентов)	Dermagraft®	8 недель	На 4 неделе была достигнута эпителизация 95% трансплантированных участков, однако последующие травмы привели к уменьшения площади эпителизированных участков до 93% на 8 неделе наблюдения	Sibbald RG, et al. 2005 [18]
Комбинированные	7 (-)	Аллогенные фибробласты и кератиноциты, помещенные на разные стороны коллагеновых губок	До 50 месяцев	Эпителизация дефектов кожи, анальгетический эффект, увеличение времени до рецидива в области трансплантированных участков примерно в 2 раза	Eisenberg M, et al. 1998 [42]
	1 (>1)	Подготовительная основа (Matriderms, бычий коллаген I, III, V и бесклеточный дермальный матрикс на основе гидролизата эластина и совместно культивированные аутологичные фибробласты и кератиноциты	2 года	Все дефекты кожи – полная эпителизация	Betsi EE, et al. 2009 [43]
	1 (>1)	Apligraf®	11 недель	Все дефекты кожи – полная эпителизация	Falabella AF, et al. 1999 [20]
	15 (78 суммарно у всех пациентов)	Apligraf®	18 недель	79% недавно появившихся дефектов кожи – полная эпителизация 4 хронических дефекта кожи – полная эпителизация	Falabella AF, et al. 2000 [21]
	9 (96 суммарно у всех пациентов)	Apligraf®	6-36 месяцев	Более чем 90% дефектов кожи – эпителизация	Fivenson DP, et al. 2003 [22]

 

About the authors

Kseniya M. Aulova

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology

Author for correspondence.
Email: aulovaksenia@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2924-3036
SPIN-code: 8310-7019

младший научный сотрудник отдела дерматологии

Россия, 3 bld. 6, Korolenko street, 107076, Moscow

Arfenya E. Karamova

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology

Email: karamova@cnikvi.ru
ORCID iD: 0000-0003-3805-8489
SPIN-code: 3604-6491

MD, Cand. Sci. (Med.), Assistant Professor

Россия, 3 bld. 6, Korolenko street, 107076, Moscow

Vadim V. Chikin

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology

Email: chikin@cnikvi.ru
ORCID iD: 0000-0002-9688-2727
SPIN-code: 3385-4723

MD, Dr. Sci. (Med.)

Россия, 3 bld. 6, Korolenko street, 107076, Moscow

Аlexey A. Kubanov

State Research Center of Dermatovenereology and Cosmetology

Email: alex@cnikvi.ru
ORCID iD: 0000-0002-7625-0503
SPIN-code: 8771-4990

MD, Dr. Sci. (Med.), Professor, Academician of the Russian Academy of Sciences

Россия, 3 bldg 6 Korolenko street, 107076 Moscow

References

Supplementary files