Новые рекомбинантные антигены T. pallidum Tp0453 и Tp0319 в диагностике сифилиса

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

С использованием методов генной инженерии разработана технология получения рекомбинантного варианта нового целевого белка T. pallidum Tp0319 для серологической диагностики сифилиса. В результате проведенных работ получен гомогенный (по данным денатурирующего электрофореза в полиакриламидном геле) рекомбинантный вариант белка T. pallidum Tp0319. Молекулярная масса рекомбинантного белка T. pallidum Tp0319, определенная по электрофоретической подвижности, составила около 37 кД, что хорошо согласуется с молекулярной массой фрагмента белка Tp0319 без сигнального пептида, рассчитанной по аминокислотной последовательности (37,3 кД). В соответствии с разработанной технологией были получены очищенные рекомбинантные белки T. pallidum Tp0319 и Tp0453. Эти белки были использованы в качестве антигенов в составе твердофазного иммуносорбента для выявления специфических IgG к исследуемому белку в сыворотке крови больных с разными формами приобретенного сифилиса. Применение полученного рекомбинантного белка позволило выявить антитела к T. pallidum в сыворотке крови больных сифилисом (первичным, вторичным, скрытым ранним и поздним). При исследовании образцов сыворотки крови, полученных от здоровых доноров, антитела не обнаруживались. Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод о возможности использования полученного рекомбинантного белка Тр0319 в качестве дополнительного антигена при диагностике сифилиса. Включение нового антигена в состав иммуносорбента тест-систем для диагностики сифилиса (в формате иммуноферментного анализа, иммуноблотинга или иммуночипа) расширяет возможности серологической диагностики данного заболевания за счет увеличения спектра определяемых антител к T. pallidum.

Об авторах

А. В. Рунина

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: runina@cnikvi.ru
Россия

Р. Ф. Хайруллин

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

К. В. Рог

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

В. И. Семина

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

С. В. Ротанов

ФГБУ «Государственный научный центр дерматовенерологии и косметологии» Минздрава России

Email: noemail@neicon.ru
Россия

Список литературы

  1. Chi B., Chauhan S., Kuramitsu H.; Development of a System for Expressing Heterologous Genes in the Oral Spirochete Treponema denticola and Its Use in Expression of the Treponema pallidum flaA Gene. Inf immun 1999; 67 (7): 3653-3656.
  2. Cameron C.E., Kuroiwa J.M., Yamada M., Francescutti T., Chi B., Kuramitsu H.K. Heterologous expression of the Treponema pallidum lamininbinding adhesin Tp0751 in the culturable spirochete Treponema phagedenis. J bacteriol 2008; 190 (7): 2565-2571. Литература
  3. Khairullin R.F., Rotanov S.V., Frigo N.V., Belousova A.V. Bioinformatic analysis of T. pallidum specific antigens Vestn Dermatol Venerol 2012; 5: 56-64.
  4. Cox D.L., Luthra A., Dunham-Ems S., Desrosiers D.C., Salazar J.C., Caimano M.J., Radolf J.D. Surface immunolabeling and consensus computational framework to identify candidate rare outer membrane proteins of Treponema pallidum. Inf immun 2010; 78 (12): 5178-5194.
  5. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. nature 1970; 227 (5259): 680-685.
  6. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical biochemistry 1976; 72 (1): 248-254.
  7. Khairullin R.F., Runina A.V., Rog K.V., Frigo N.V., Rotanov S.V. Production and evaluation of the clinical efficacy of the recombinant T. pallidum antigen Tp0453 for syphilis diagnosis. Vestn Dermatol Venerol 2013; 6: 73-79.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Рунина А.В., Хайруллин Р.Ф., Рог К.В., Семина В.И., Ротанов С.В., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 60448 от 30.12.2014.


Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах